实验室标准操作规程
实验室标准操作规程也称为作业指导书,是用来明确某项具体工作的操作程序或技术要求,是规章制度的细化和充实,是告知从业人员应该如何操作的文件。因此,SOP必须具有针对性、程序性规范性和可操作性。针对实验动物设施运行管理,SOP至少应覆盖以下几方面内容:实验动物福理审查程序与方法;人员、物品、动物出入设施的通过程序与净化方法;各种物料的准备与消毒处理方法;设施内环境的保持标准与方法;设施内、外环境的秩序与卫生管理;各种设备的操作程序与维护方法;不同品种、品系动物的繁育饲养管理程序与方法;动物疾病控制的程序与方法;各种文件资料的记录与保存方法等。
1.微生物标准操作
1.1操作规程
(1)正在处理培养物或标本时,由实验室主管限制或控制外来人员进入实验室
(2)实验人员在处理完生物活性物质、脱下手套、离开实验室之前必须洗手
(3)工作区内不得进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品以及存放工人食用的食物。戴隐形眼镜的实验人员仍需佩戴护目镜或面罩。食物应存放于工作区外的专用橱柜或冰箱内。
(4)禁止使用口吸移液技术,应使用机械移液装置。
(5)制订使用锐利器具,如注射器针头、手术刀片等的安全保护方案。
(6)仔细进行每一步操作,以减少飞溅物或气溶胶的产生。
(7)工作台面应至少每天消毒一次,发生生物活性物质泼洒时应及时消毒。
(8)所有培养物、储存物及其他废物在排放前,应先经过可靠的消毒,如高压灭菌处理。需在实验室外邻近处进行消毒处理的物品,必须存放于结实耐用、防扩散的容器中,从实验室运出时应密闭,并依据当地政府的相关规定进行安全包装后,才能从实验室移出。
(9)有传染性病原体时,应在实验室人口贴上生物危害的标志,标志上要包括所使用的病原体名称以及研究者的姓名和联系电话。
(10)昆虫和啮齿类动物管理方案参看《实验室生物安全手册》。
1.2微生物标准操作注意事项
(1)在开始进行微生物操作时，在台项前应铺以浸有消毒液并拧干的毛巾以减少培养物滴落个形成的气溶胶。
(2)在实验室中,养成不以双手接触口、鼻、眼、面的习惯。做完一种工作即减少培养物滴落形成的气溶胶。应洗手消毒,切勿通过工作人员的手造成新的污染。
(3)接触危险性较大的微生物(包括血清诊断标本)时,应戴乳胶防护
(4)玻璃器皿应尽量用塑料制品代替,以减少打碎或外伤事故。手套
(5)养成工作后清理环境的习惯,不要在工作台上或污物盘中遗留污染物品。所有存放菌种或污染物品的容器都应密闭,并标以通用标记以引起其他人
(6)定期检查清理存放菌种和标本的冰箱、液氮罐或其他容器,将不需要的员注意东西消毒处理。对危险性较大的微生物,检查处理时应戴口罩与手套。
(7)密闭性自动化检验设备一般有助于减少污染,但必须实验证明确实安全后再予推准。
1.3化学品标准操作
在生物安全实验室,工作人员不仅会接触动物和致病微生物,也会接触化学品,因此,充分了解这些化学品的毒性作用、暴露途径以及可能与操作和储存这些化学品有关的危害是非常必要的,所以进一步制订标准化的操作规程和使用规定等管理制度就显得尤为重要。
生物安全实验室对化学品的管理和使用应遵循以下原则
(1) 在实验室中,对化学品的存放、处理、使用及处置的规定和程序均应符良好的化学实验室行为标准
(2) 应按照相关标准在每个存储容器上标明每个产品的危害性质和风险性,还应在使用中材料的容器上清楚标明。
(3) 对化学、物理及火灾危害应有足够且可行的控制措施。应定期对这些措施进行监督,以确保其有效可用。应保存监督结果记录。
(4)应要求所有人员按照安全操作规程工作,包括使用被认为适用于所从事工作的安全装备或装置。
(5)对实验室内所用的每种化学制品的废弃和安全处置,应有明确的书面程序。该程序应包括对相关法规的充分及详细说明,以保证完全符合其要求,使这些物质安全及合法地脱离实验室控制。
1.4实验室仪器标准操作
1.4.1注射器的使用用注射器取血或有关操作,戴手套可以较好地防止皮肤与各种污染物直接接触,但不能预防刺伤性感染。
取血时,是否受到带有HIV、HBV及其他血传病原体的污染,与下列因素有关:
①卫生保健人员技术熟练程度。
②操作频率和常规还是紧急情况操作。
③动物体液是否染有HIV、HBV和其他血传病原体,及其血浓度的高低。
④接触时是否有皮肤损伤。
⑤个人对HBV是否有过注射免疫。在普遍防御中,所有的血液都被认为是传染的,有下列情况必须戴手套:手有伤,因动物不合作有可能使操作者受到感染;用注射器注射微生物时,也容易出现问题造成事故。
由于操作不当,误注射常有发生。为此,应注意以下事项
(1)针头必须牢固安装在注射器上,防止用力过大使针头突然脱落产生气溶胶。最好是使用带锁扣的针头与注射器
(2)从带橡皮塞的瓶中抽取微生物悬液时应用棉球将瓶口与针头围住,以防向内注入空气或拔出针头时产生的气溶胶溢出。
(3)抽吸微生物悬液时,尽量减少泡沫的产生;推出气体必须用棉球包住针头。吸有悬液的注射器的针头也应用棉球包好,以防不慎推动针栓将悬液喷出。
(4)动物必须确实固定好后才能注射,注射时要选择柔软部位;注射时受阻应改换部位或检查原因,排出故障,不得过分用力推动针栓。
(5)在注射前后都应用乙醇消毒动物的注射部位,防止微生物悬液污染皮毛后产生气溶胶,或造成其他污染
(6)操作者手的位置一定要保持在针头的后面,以防误伤自己。
(7)注射完毕,应将注射器针栓抽出并全部浸入消毒液内。